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OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit (Colorimetric)

Catalog Number Unit Size
BO-GLU-T100 100 assays
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상품 정보

상품 상세설명

제품설명

BIOMAX 사의 OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit는 Sample에 존재하는 Total GSH의 양을 측정하기 위한 제품입니다. Total GSH는 산화형인 GSSG가 NADPH, Glutathione Reductase에 의해 2개의 GSH로 환원되고, 환원된 GSH와 기존 Sample 내에 존재하는 GSH가 DTNB와 반응하면서 노란색인 TNB를 형성하여 흡광도 412 nm에서 측정됩니다.


OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit
  

제품구성

Components

Size

Storage

Assay Buffer

60 ㎖

4 ℃

GSH Standard (4 mM) 2 ㎖
Glutathione Reductase(GR) 5 ㎖
NADPH (Lyophilized) 1 Bottle
Chromogen (DTNB) 5 ㎖
* 개봉하지 않은 제품은 빛을 차단한 상태에서 4℃ 보관 시 약 6 개월 간 안정적입니다.

결과분석

① GSH STD 에서의 각 농도의 시간별 기울기 값을 구합니다.

    - OD412nm 에서 흡광도 측정시 값의 변화는 선형으로 나타나며, 선형 그래프의 함수는 다음의 식에 결정됩니다.


회귀 방정식 : y= ax + b


y = OD412nm
a = 기울기 (slope)
x = x 축 값
b = 절편

- 절편의 의미는 DTNB Background와 NADPH 첨가하여 반응 시작한 시간적 차이에 따라 달라지는 요소이므로, 따라서 절편은 제외할 수 있습니다.


OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit



② ①에서 구한 기울기에 0 µM에서의 기울기 값을 빼줍니다. [Net Blank Slope]


OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit 

③ GSH STD 에서 구한 Net blank slope 값을 이용하여 선형 그래프를 그립니다. [GSH Calibration curve.]

④ ③ 번 선형 그래프의 함수를 그려줍니다.


OxiTec™ Total Glutathione Assay Kit


Table 1.에서의 Net blank slope 값만 표시한 표이며, Max con.은 5 µM 까지만 표시한 표입니다.



⑤ sample 의 시간별 기울기 값을 구합니다.

⑥ sample 기울기를 GSH Calibration curve를 이용하여 GSH 농도값(μM)을 구합니다.

⑦ 각각의 농도값에 희석배수를 곱해줍니다.

 - Datasheet 앞 Sample preparation 과정에서 희석된 배수입니다.



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